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應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥,綜合 | | |
鎳柱是一種在蛋白純化中廣泛應(yīng)用的純化柱料,屬于固定化金屬離子親和色譜技術(shù)的一種。以下是詳細(xì)產(chǎn)品介紹:
鎳柱純化原理:過渡金屬通過與電子供體配基上,能與金屬離子相互作用的羧基或氨基的電負(fù)性元素(O,N),形成較穩(wěn)定的金屬螯合物。在IMAC中,一個Ni2+有六個配位位點(diǎn),被含有3,4或5個電子供體基團(tuán)(配位位點(diǎn))的螯合物固定在吸附劑上,而剩下未被占據(jù)的位點(diǎn)暴露于溶液中,能與一些氨基酸的側(cè)鏈或His標(biāo)簽的蛋白特異性結(jié)合。
在Ni柱的使用中,應(yīng)當(dāng)避免緩沖液中存在還原劑和螯合劑,以免Ni2+被還原而脫落。如果柱料使用太久積累了很多雜蛋白,可用EDTA將Ni2+螯合下來,再用NaOH清洗柱料后,重新螯合Ni離子,即可完成再生。
具有高分辨率、高載量、流速快、物理和化學(xué)穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn),適用于分離能被螯合的金屬離子吸附的多肽、蛋白、核苷酸、磷酸化蛋白及帶His標(biāo)簽的重組蛋白等。同時,再生和清洗也相對簡便,使其成為蛋白純化領(lǐng)域的重要工具。